NY∕T 3081-2017 番茄抗番茄黄化曲叶病毒鉴定技术规程(农业)

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2021-12-23

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ICS 65.020,?16 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY/T 3081-2017,番茄抗番茄黄化曲叶病毒鉴定技术规程,Rule for evaluation of tomato resistance to tomato yellolV leaf curl virus,2017 - 06 -1 2 发布20 1 7 - 10 - 01 实施,气;、中华人民共和国农业部发布,前,本标准按照G?! T 1. 1二2009 给出的规则起草,本标准由农业部种植业笆理司提出,本标准由全国蔬菜标准化技术委员会CSAC/TC 467) 归口,本标准起草单位。中国农业科学院蔬菜花卉研究所,本标准主要起草人。谢丙炎、冯兰香、杨字红、茹振) 1 1 、陈国华、凌挝、杨翠荣,NY! T 3081-20 17,l,NY/ T 3081-20 17,番茄抗番茄黄化曲叶病毒鉴定技术规程,范围,本标/11 规定了番茄抗番茄1ft化rll [11"1-病毒(/OI1/0! O yelLow leaf curL viru . ..;) 的鉴定方法和评价方法,本标叫i 适用于所有番茄( SoLa l/l川Lyω户U 川c um L ) 品种及材料抗番77i1 黄化1111 叶病毒的室内鉴定,及抗性评价,2 规范性引用文件,下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文,件。凡是不注日期的引用文件.其最新版本( 包括所有的修改-"y1) 适用于本文件,G?/ T 6682 分析实验室用水规格5fn 试验方法,3 术语和定义,NY/ T 1858 . 7 界定的以及下列术语和定义适用于本文件,3. 1,番茄黄化曲叶病毒IOmaW yellow leal cllrl l'irllS , TYLCV,属于双生病毒科(Geminiviridae) 菜豆金色花il-r病毒1m. (BegoJl'lοviru s)~ 病苟-粒体为双联体结构,向,两个不完整的二十面体组成, 无包膜。是一种通过炯粉虱和l嫁接传播,可严重危害多种双子il十植物的童,安病毒,3. 2,番茄黄化曲叶病(oma(o yellow leaf ClIrI disease, TYLCD,111 番茄i黄化II11 叶病毒引起的番茄i病毒病害。病在i金IfJr参见附录/\ ,注1束?可窑的主要症状是病时明血变小、皱销. Ilit 问变筑、111 缘鲜政. 111 片卷1111 呈杯状或f,l状,m株严巫矮化顶部形,似菜花状,4 试if1J 与材料,除非另有说明, 本方法所用试开IJ 均为分析纯, 水为GB/ T 6682 中规定的三级7J( ,4. 1 MS 培养基,4. 1. 1 MS 液体培养基,称取MS 干粉u飞15 19)4 . '13g 泊湖!f 30 g , 1J11水定容至1 000 m L . 搅拌均匀并济化后. 调节p l-I :如~ 5. 8 ,于1 2 1 '( 高压灭茵3 0 min , 4'( 下似有一备j抖,4. 1. 2 MS 固体培养基,称且~ MS 干粉(M 5 1 9)4 . 43 g 、煎:jj!f 30 g 、J]~J.脂粉9 g . 1m水定容至1 000 m L ,搅拌均匀fj 游化后,调节,p J-l 为5 . 8 , 干121 '( 高压灭菌3 0 m in , 4'( 下保存备用,4. 2 YEP 培养基,4. 2. 1 YEP 液体培养基,称且'<1民蛋白j陈1 0 g 、酵母提取物lO g 、1~{ 化1'1'1 5 g . 1111水950 m L , )刊5 moll L 氢氧化例熔ìl~ 调节p H,为7 . 0 定容至1 00 0 m L ,于121 '( 高JT.灭j!f?30 m i n , 4 'C 下保存备J+J ,4. 2.2 YE P 固体培养基,NY / '1' 3081-2017,称取)J9?蛋白)陈1 0 g 、酵l过提取物10 g 、氯化创5g 、~、脂粉9 g , !m水950 m L ,用5 mol/ L 氢氧化制济,液调节pH 为7 . 0 定容至1000 01L. 于121'C 高压灭菌30 min . 4 'C 下保存备用,4. 3 抗生素母液,4. 3. 1 卡那霉素母液(50 mg/ mL),称取25 0 mg 卡那篇素. 溶人5 O1L 7)( 中后, 在超净台内注入501 L 的一次性注射然中, 经硝酸纤纬,索)J草(于L径。. 22μ01) 过蜫f 灭菌. ~JJ得50 mg/ 01 L 卡那每京:每液。分装到5 个灭菌的2 mL 冷冻管里, 每,笆101L ,直2'C~8'C 冰箱中保存, 可使用1 个月;或20'C 长期保存,4. 3. 2 利福平母液(50 mg/ mL),称收25 0 m g 利很平于E P 但,净台内注入5 01 L 的一,桶平l寻液。分装到51,4. 3. 3 Z l!i先丁香丽母,事-F取98 . 1 O1g,ì'j'台内注入501L,乙,5,5. 1 高,灭菌凰,加热器,5.2 超净工,洁净等级,0. 25 m/ s~O,5. 3 恒温培养箱,括:泪范围, 5'C,5. 4 植物生长箱,温度范围, O'C~50'C,170 卢刚/ (m' . s) 两阳光!!R;,5. 5 超低温冰箱,7昆控范围- 60'C~ 一105'C , 功率1200 W , 除声~63 d?,5. 6 恒温摇床, 再加水定容至5mL ,然后在超,口除菌, 即配成50 01g/ 01 L 和l,个月,5 ……

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